Journal des soins infirmiers et des soins

Test génétique préimplantatoire pour l'aneuploïdie : de nouvelles améliorations grâce à la technique de biopsie liquide non invasive

Abstract

Jan Tesarik

Le test génétique préimplantatoire pour l'aneuploïdie (PGTA) a été initialement effectué en examinant le premier et le deuxième corps polaire. Cependant, il a ensuite été progressivement effectué en inspectant les cellules trophectodermiques (TE) des blastocystes. Récemment, on s'inquiète de plus en plus de la qualité inébranlable de cette procédure qui a été entièrement testée de manière adéquate dans des modèles animaux et des tests précliniques humains. Les principaux problèmes du PGTA utilisant la biopsie TE peuvent être décrits comme suit : (1) La récurrence des cellules TE aneuploïdes ne reflète pas vraiment celle de la masse cellulaire interne (ICM) qui donnera naissance au futur bébé, (2) la dispersion des cellules TE euploïdes et aneuploïdes n'est pas irrégulière mais plutôt clonale, ce qui rend difficile l'obtention de données fiables sur la récurrence de l'aneuploïdie dans l'ensemble de l'organisme non développé, et (3) l'évacuation des cellules TE est intrinsèquement horrible, peut diminuer le potentiel d'implantation de l'organisme non développé et produire des effets à long terme sur la santé de la progéniture. Étant donné que, dans l'ensemble, le PGTA est pratiqué chez des femmes plus âgées, avec peu d'organismes non développés et modérément sensibles, la méthode basée sur la biopsie TE peut entraîner une lésion irréparable en raison de la pulvérisation accidentelle d'organismes non développés ou de l'oblitération intentionnelle d'organismes naissants potentiels considérés comme aneuploïdes en raison d'un faux résultat positif au PGTA. À l'inverse, le PGTA utilisant une biopsie liquidienne non intrusive repose sur l'examen de l'ADN cellulaire sans ADN délivré à la fois par les cellules TE et ICM au milieu de culture, permettant ainsi une évaluation plus ciblée de la ploïdie de l'organisme naissant dans son ensemble. Je présente ici les dernières informations obtenues en comparant les résultats de l'évaluation de la ploïdie obtenus à partir d'une analyse d'ADN cellulaire sans ADN avec ceux obtenus par l'examen de l'ADN obtenu à partir d'organismes non développés entiers fournis pour l'étude à des patients consentants. Ces résultats montrent clairement la prévalence du PGTA non intrusif basé sur la biopsie liquidienne (sans ADN cellulaire) à partir de milieux de culture usagés par rapport à la biopsie TE ordinaire, avec une diminution significative de la traduction

Depuis le rapport initial de Stigliani et al. sur la présence d'ADN mitochondrial et atomique dans le milieu de culture d'organismes naissants humains, les milieux usés (MS) ont été largement étudiés dans le but définitif de créer des stratégies de tests génétiques non intrusifs (NI PGT). Même après la première utilisation clinique du NI PGT-A par Xu et ses associés utilisant le MS, la viabilité de la stratégie pour l'utilité clinique reste sujette à de nombreuses discussions car il existe des rapports contradictoires sur ses taux de réussite et des inquiétudes concernant la contamination de l'ADN non intrusif. Deux angles clés déterminent la réussite d'un test NI PGT ; 1) les limites embryologiques des conditions de culture et 2) les techniques atomiques utilisées pour la gestion en aval des tests SM. La grande majorité des études sur le PGT NI ont jusqu'à présent utilisé des tests SM obtenus à partir d'un seul centre de FIV et donc des différences dans le choix des milieux de culture, des volumes de culture, du type de culture (neuve ou vitrifiée-décongelée) et du moment de l'examen (Jour 3-Jour 5/6 ou Jour 4-Jour 5/6) auraient, dans une certaine mesure, contribué aux différences dans les taux de progression obtenus par différents groupes (Shamonki et al., 2016, Xu et al., 2016, Feichtinger et al., 2017, Lane et al., 2017, Kuznyetsov et al., 2017). Par conséquent, il est approprié de développer une stratégie PGT NI puissante et adaptable, utilisable dans différentes limites de culture d'organismes naissants. Le choix de la technique d'intensification du génome entier (WGA) est une autre considération importante qui peut affecter la réussite de l'examen PGT NI. Français Comme l'ADN non développé dans les milieux usés est sans aucun doute divisé par nature, des longueurs de disposition d'ADN plus limitées peuvent présenter un test pour les sciences de certaines stratégies WGA (Wang et al., 2004). De plus, certains segments de milieux de culture d'organismes non développés peuvent bloquer la capacité de soutien ainsi que de catalyseur du cadre WGA, ce qui entraîne une amélioration imparfaite ou inexistante. Nous avons essayé deux stratégies WGA abordables sur des tests SM, en particulier Sureplex et MDA malgré une approche MDA modifiée (adaptée à l'ADN divisé) et avons constaté que les taux d'intensification de l'ADN étaient fondamentalement plus élevés dans les échantillons améliorés avec le MDA modifié par rapport à ceux améliorés par les techniques Sureplex et MDA. L'apparition d'ADN présent dans le SM peut être un élément frustrant pour la mesure NI PGT. La contamination microbienne a été signalée comme se produisant à une fréquence inférieure à 1 % dans les sociétés de FIV traditionnelles, mais curieusement, aucune dans les sociétés d'organismes initiaux préparées par ICSI. Plus récemment, Vera-Rodriguez et al. (2018) ont détaillé des niveaux significatifs de pollution de l'ADN maternel avec seulement ∼8 % de la division de l'ADN dans le SM étant embryonnaire au début. Cependant, avec des conditions de culture et des techniques d'intensification appropriées, quelques groupes différents (Xu et al., 2016, Kuznyetsov et al., 2017, Lane et al., 2017), y compris le nôtre, ont obtenu des taux élevés de chromosomes sexuels ainsi que des taux de concordance de ploïdie générale (plage : 72 % - 95 %) entre les biopsies SM et TE correspondantes. Cela indique que toute contamination potentielle présente dans ces exemples était négligeable et n'a pas bloqué le résultat ; soulignant ainsi l'importance d'une pratique de culture embryologique satisfaisante ainsi que des projets de préparation en aval appropriés pour une étude NI PGT-A fructueuse. Bien que quelques essais cliniques NI PGT-A aient été lancés au cours des deux dernières années, de nombreuses questions importantes concernant la viabilité clinique plus large de la méthode restent encore à répondre. Quoi qu’il en soit, il semble que nous soyons un peu plus proches que jamais du fantasme d’une stratégie totalement non intrusive de tests génétiques sur les organismes naissants préimplantatoires.